集中空调送风中嗜肺军团菌检验仪器试剂耗材

集中空调送风中嗜肺军团菌检验仪器试剂耗材

集中空调送风中嗜肺军团菌检验方法
16.1 G.1 总则
本附录规定了用液体冲击法测定集中空调系统送风中的嗜肺军团菌。
16.2 G.2 术语和定义
下列术语和定义适用于本方法。
G.2.1
嗜肺军团菌  legionella pneumophila
样品经培养在GVPG琼脂平板上生成典型菌落，并在BCYE琼脂平板上生长而在L-半光氨酸缺失的BCYE琼脂平板不生长，进一步经生化实验和血清学实验鉴定确认的菌落。
16.3 G.3 仪器和设备
G.3.1  微生物气溶胶浓缩器：采样流量≥100 L/min.，对于直径3.0μm以上粒子其捕集效率≥80%或浓缩比≥8。
G.3.2 液体冲击式微生物气溶胶采样器：采样流量7 L/min-15 L/min.，对于0.5μm粒子的捕集效率≥90%。
G.3.3 离心管：容积50 mL。
G.3.4 平皿：Φ90 mm。
G.3.5  CO2培养箱：35℃～37℃。
G.3.6  紫外灯：波长360 nm±2 nm。
G.3.7  涡旋振荡器。
G．3.8 普通光学显微镜、荧光显微镜。
G．3.9 水浴箱。
 
16.4 G.4 试剂和培养基
 
G.4.1  采样吸收液1-GVPC液体培养基(GVPC液体培养基基础 货号026072，规格250克）
 
G.4.1.1 GVPC添加剂成分：
多粘菌素B硫酸盐    10 mg
万古霉素    0.5 mg
放线菌酮    80 mg
 
G.4.1.2   BCYE添加剂成分：
α一酮戊二酸    1．0 g
N-2酰胺基一2胺基乙烷磺酸（ACES）  10.0 g
氢氧化钾    2. 88 g
L-半胱氨酸盐酸盐   0.4 g
焦磷酸铁    0. 25 g
 
G.4.1.3  吸收液成分：
活性碳    2g
酵母浸出粉    10 g
GVPC添加剂    见G.4.1.1
BCYE添加剂    见G.4.1.2
蒸馏水    1000 mL
G.4.1.4制法：将活性碳、酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高压灭菌15 min，加入GVPC添加剂（G．4.1.1）和BCYE添加剂（G.4.1.2），分装于灭菌后的离心管（G.3.3）中备用。
G.4.2  采样吸收液2-酵母提取液
G.4.2.1  吸收液成分：
 
酵母浸出粉    12 g
蒸馏水    1 000 mL
G.4.2.2制法：将酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高压灭菌15 min，分装于灭菌后的离心管（G.3.3）中备用。
 
G.4.3  盐酸氯化钾溶液[c（HCI·KCI） =0. 01 mol/L]
G.4.3.1成分：
盐酸（0.2 mol／L）    3.9 ml_,
氯化钾（0.2 mol/L）    20 mL
G.4.3.2制法：将上述成分混合，用1mol/L）氢氧化钠调整pH=2.2±0.2，121℃下高压灭菌15 min备用。
 
G.4.4  其他试剂
G.4.4.1 GVPC琼脂平板。
G.4.4.2   BCYE琼脂平板。
G.4.4.3   BCYE-CYE琼脂平板。
G.4.4.4 革兰氏染色液。
G.4.4.5 马尿酸盐生化反应管。
G.4.4.6 军团菌分型血清试剂。

集中空调送风中嗜肺军团菌检验仪器试剂耗材

产品名称	规格	说明
耐高温高压采样瓶	500ml	可湿热灭菌
一次性无菌平皿	90mm	10个/包，500个/箱
GVPC琼脂平板	20皿/盒	用于选择性分离、培养军团菌。
BCYE琼脂平板	20皿/盒	用于分离、培养军团菌属细菌。
BCYE-CYS琼脂平板	20皿/盒	用于分离、培养军团菌属细菌。（不含L-半胱氨酸盐酸盐）
采样吸收液1-GVPC 液体培养基	20ml*18支	用于空调系统中嗜肺军团菌采样时吸收液
采样吸收液2-酵母提取液	20ml*18支	用于空调系统中嗜肺军团菌采样时吸收液。
BCYE琼脂基础	100g
BCYE生长添加剂	10支/盒
GVPC琼脂基础	100g
GVPC添加剂	5支/盒
GVPC液体培养基基础	250克
GVPC液体培养基配套试剂
采样吸收液2-酵母提取液	400克	酵母浸出粉
紫外灯（360nm）	360nm	含360nm滤光片200
紫外防护眼镜		建议观察荧光实验使用紫外灯防护眼镜
3联不锈钢过滤系统	3联	含3联不锈钢支架，真空泵，，火焰喷枪
无菌滤膜	200张/400张
二氧化碳培养箱	进口/国产	军团菌培养
离心机	国产	1000r/min 以上
漩涡混合器	国产	用于混合
军团菌阳性对照菌株	1支/株	血清型1型
军团菌生化鉴定套装	20测试/盒	7种生化管葡萄糖、乳糖、麦芽糖、硝酸盐（还原）、马尿素盐、尿素、明胶、配套试剂各1瓶(茚三酮试剂、硝酸盐还原试剂甲、乙液)，无菌生理盐水
军团菌大套血清	22瓶	22瓶（每瓶1毫升），
军团菌中套血清	13瓶	13瓶（每瓶2毫升）
军团菌小套血清	3瓶	包含了最常见的LP1，LP6以及多价血清
嗜肺军团菌1型诊断血清	1瓶	单支
嗜肺军团菌多价诊断血清（LP2-LP15）		2-15型有多价也有单支独立的 。
军团菌乳胶凝集试剂盒	50测试/盒	用于嗜肺军团菌血清1型和2~15型的鉴定，可在2分钟内对选择性培养基上分离的可疑菌落进行鉴定

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