铜绿假单胞菌快速检测仪器试剂
- 发布时间:2018-09-27
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铜绿假单胞菌快速检测仪器试剂
铜绿假单胞菌检测传统国标方法:参 考 《饮 用天然矿泉水检验方法》GB/T8538-2008/54 铜绿假单胞菌-滤膜法进行检验。
具体步骤:将250 mL水样用孔径为0.45 μm的滤膜过滤,并将滤膜移至CN 琼脂选择性培养基上,36 ℃±1℃恒温培养48 h。铜绿假单胞菌在CN琼脂出现的菌落形态有3 种:有脓青素产生的蓝/绿色、无荧光的菌落,直接判为检出;产生有荧光素的黄色菌落,进一步做产氨(乙酰胺肉汤)试验确认,产氨试验阳性的判为检出;产生红脓素的红褐色、无荧光的菌落,要继续做氧化酶试验、产氨试验、荧光(金氏B 斜面)试验,若氧化酶阳性、产氨试验阳性结果判为铜绿假单胞菌检出。
铜绿假单胞菌快速检测试剂盒快速检测法简介:
本试剂盒采用环介导的恒温扩增法技术,用于包装饮用水等水体中铜绿假单胞菌的快速检测,并借助显色指示剂直接判断结果。
铜绿假单胞菌快速检测试剂盒原理:
环介导等温扩增法( loop-mediated isothermal amplification , LAMP)是2000 年开发的一种新颖的恒温核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6 个区域设计4 种特异引物,利用一种链置换DNA 聚合酶在等温条件(63 ℃左右) 保温30-60分钟,即可完成核酸扩增反应。与常规PCR相比,不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程。LAMP 是一种全新的核酸扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,不依赖任何专门的仪器设备实现现场高通量快速检测,检测成本远低于荧光定量PCR。
铜绿假单胞菌快速检测仪器不需要昂贵专业仪器,但需要以下必备仪器设备:
本试剂盒需要能准确提供60-65℃及99℃恒温条件的任何通用设备,如恒温水浴锅,恒温箱、恒温金属浴、PCR仪等。
前处理必备仪器:膜过滤系统——推荐3联不锈钢过滤系统
离心机——具备12000RPM转速,适用24*1.5ml离心管的离心机
微量移液器——移取量分别为1000μl,30μl,70μl,2.5μl的移液器
铜绿假单胞菌快速检测试剂盒组成:24测试/盒
规 格 | |
干粉试剂 | 1管 |
复溶液 | 1管 |
裂解液 | 1管 |
阳性对照 | 1管 |
阴性对照 | 1管 |
显色指示液 | 1管 |
铜绿假单胞菌快速检测试剂操作步骤:
1、抽滤,提DNA
将 250 mL 水样用孔径为0.45 μm 的滤膜过滤,将滤膜转移至100 mL TSB培养基(内含溴化十六烷基三甲胺和萘啶酮酸),选择增菌18 h 后,吸取1 mL 增菌液,煮沸法提取DNA。
2、扩增反应:
根据说明书进行扩增反应,将所有待测样品及阳性阳性对照反应管放入恒温仪器,64℃
恒温反应一小时。
3、结果判定:
反应结束后,不开盖观察结果。结果观察在白色背景下进行,阴性对照管呈淡橙色,阳性对照反应管呈荧光绿,待测样本反应管以此为对照进行判读。
铜绿假单胞菌快速检测试剂注意事项:
本试剂盒基于核酸的分子检测,因此并非只能检出铜绿假单胞菌的活菌,判定结果有时与传统培养法不同。使用显色指示剂时,在检测结束后请勿开盖,以防气溶胶污染。
更多介绍详见铜绿假单胞菌快速检测试剂说明书。
操作示意图(试剂实际用量,反应时间等请参照铜绿假单胞菌快速检测试剂说明书,以下图片仅供参考)

(铜绿假单胞菌快速检测试剂检测示意图)

铜绿假单胞菌快速检测试剂必备仪器设备推荐型号:
名称 | 型号 | 备注 | 目录价 | 优惠价 |
3联不锈钢过滤系统 | MFS-3A-250-k | 含真空泵,滤膜喷枪。 | 14500 | 来电咨询 |
恒温金属浴 | K30 | 配置A,D两模块 | 2900+500 | 来电咨询 |
离心机 | H1-16K | 12000rpm,另外配置角转子。 | 4300+2800 | 来电咨询 |
微量移液器(进口) | D-10 | 0.5-10μl (含2.5μl) | 2357 | 1450 |
微量移液器(进口) | D-100 | 10-100μl (含30,70μl) | 2105 | 1350 |
微量移液器(进口) | D-1000 | 100-1000μl | 2105 | 1350 |