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水产养殖弧菌培养基

  • 发布时间:2017-04-18
  • 发布者: admin
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水产养殖弧菌培养基

弧菌是对虾细菌性疾病的条件致病菌,一般水体中弧菌数量取决于养殖环境的优劣,当水体中弧菌的数量达到一定数值后就有发生疾病的危险。
水产养殖弧菌培养基包括TCBS琼脂培养基与弧菌显色培养基
TCBS琼脂全称:硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂,简称TCBS琼脂。
水产养殖弧菌培养基TCBS琼脂原 理:
  蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可刺激弧菌的生长;蔗糖是可发酵的糖类;胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂;溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。TCBS琼脂的原理就是发现蔗糖发酵产生酸的菌落,霍乱阳性,副溶血性弧菌阴性。
副溶血性弧菌不发酵蔗糖,菌落呈蓝绿色
霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色。
溶藻弧菌菌落呈黄色。
霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色。然后,这些有机酸,也被这种细菌利用,分解成二氧化碳挥发了,有机酸没有了,菌落就重新变成绿色的了。
TCBS培养基中的牛胆粉有抑制其他革兰氏阳性菌的作用,与枸橼酸钠和硫代硫酸钠合用时,对大肠杆菌有明显抑制作用。同时枸橼酸钠和枸橼酸铁可使霍乱弧菌免受其他抑菌剂的作用,加之有营养丰富的酵母浸粉,霍乱弧菌又能利用蔗糖分解产酸,所以菌落较大,且呈黄色。大肠杆菌等杂菌菌落较小或不生长,故易识别。
黄色菌落只要是利用培养基中的蔗糖产酸,菌落就是黄色的,像溶澡弧菌、河流弧菌、麦氏弧菌、等要本培养基上均为黄色菌落,并不是黄色菌落就是霍乱弧菌。样品中常常存在大量可以发酵蔗糖的干扰细菌,常常会碰到整个平板会变黄色的现象。
水产养殖弧菌培养基(TCBS琼脂)配方(每升):
  酵母膏粉 5g
  蛋白胨 10g
  氯化钠 10g
  柠檬酸钠 10g
  硫代硫酸钠 10g
  胆酸钠 3g
  牛胆粉 5g
  蔗糖 20g
  柠檬酸铁 1g
  琼脂 15g
  溴麝香草酚兰 0.04g
  麝香草酚兰 0.04g
  最终pH 8.6±0.2
水产养殖弧菌培养基使用方法:
1、称取TCBS琼脂89g,加入蒸馏水或去离子水1 L,加热搅拌煮沸1—2min溶解后,勿高压灭菌,冷至50℃左右,倾注灭菌平皿,待凝固后备用。
2、测食品:取待检菌的新鲜纯培养物划线接种于平板上,36±1℃培养18—24h。
测水样:取水样(可稀释)0.05mL,滴入制好的培养皿培养基上,用灭菌的三角涂布棒将菌液涂抹均匀,平放于操作台上数分钟,使菌液渗入培养基。36±1℃培养。
   选用TCBS作为分离培养各种弧菌的培养基,特异性不是很强;不少细菌在TCBS上也能生长,但生长较慢,需要培养24h后方可长成0.5~1mm的黄、绿色菌落。为有效排除干扰,及时准确地判断出是否存在弧菌属细菌,可结合弧菌属细菌在TCBS培养基上生长的特点:弧菌生长快,菌落大,培养4-5h原划线处有菌苔生长,8-10h可长出小菌落,16h菌落可达2mm;其他菌在TCBS上则无此特点。因此在筛选弧菌属细菌的选择性培养基时要特别注意在确定的培养时间内进行菌落的观察,时间超过即影响其准确性。TCBS培养基筛选的细菌并非全为弧菌,而且弧菌可能只占很少的一部分,其余大量的是其他种类的细菌,如大洋芽孢杆菌和芽孢杆菌可以在TCBS培养基上大量生长。
水产养殖弧菌培养基产品信息:
产品名称 厂家       规格 货号 目录价
TCBS琼脂培养基 广东环凯   250克 025020 127
TCBS平板培养基 广东环凯    20皿/盒 CP0250 110
TCBS琼脂培养基 北京陆桥   250克 CM402 125
TCBS平板培养基 北京陆桥   20皿/盒 PB023 100
TCBS琼脂培养基 进口OXOID    500克 CM1171B 来电咨询
弧菌显色培养基 科玛嘉       1000ml K06A 1000
我公司供应陆桥,环凯,科玛嘉,OXOID等多个知名品牌水产养殖弧菌培养基产品,价格货期请来电咨询。

弧菌显色培养基

针对副溶血性弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌的分离和检测
显色培养基是以选择性强、准确率高而被广泛应用 。它是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。这些相应的显色底物是由产色基团和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色基团显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对 菌种作出鉴定。 利用显色培养基进行微生物的筛选分离,其反应的灵敏度和特异性大大优于传统培养基。在弧菌所相应的标准中已经把显色培养基作为分离培养基,结合标准中的增菌要求充分发挥显色培养基 的优势,从而提高弧菌的检出率。
在科玛嘉弧菌显色培养基上,霍乱弧菌呈蓝色、蓝绿色到绿色,副溶血性弧菌呈圆形、半透明、表面光滑的粉紫色;

微生物的典型特征

副溶血性弧菌→紫红色
创伤弧菌/霍乱弧菌→蓝绿色至翠蓝色
溶藻弧菌→无色
 
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